清半夏及其效应成分对急性肺损伤炎症反应的改善作用研究
Study on the Improvement Effect of Pinelliae Rhizoma Praeparatum Cum Alumine and Its Active Components on Inflamma-tory Response in Acute Lung Injury
摘要目的 探究清半夏及其效应成分对急性肺损伤(ALI)小鼠炎症反应的改善作用.方法 以脂多糖(LPS)诱导小鼠ALI为整体动物模型,以肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平、总蛋白浓度、炎性细胞数,肺湿质量/干质量比值、肺组织病理损伤情况为指标;以LPS诱导RAW264.7 巨噬细胞为体外实验模型,以胞内炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平为指标;采用系统溶剂萃取法、硅胶柱层析法,对清半夏治疗ALI的效应部位及成分进行分离和筛选.质谱分析效应部位成分组成,测定效应部位中环二肽类成分的含量,并体外验证环二肽的抗炎活性.结果 清半夏水提醇沉上清液萃取得到的乙酸乙酯萃取部位(简称乙酸乙酯部位)对ALI小鼠炎症反应有显著改善作用,并能显著降低LPS诱导的RAW264.7 细胞胞内TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平.乙酸乙酯部位经硅胶柱层析法分离得到的Fr.1 部位具有体外抗炎作用.质谱测定Fr.1 部位中 2 种主要环二肽类成分cyclo-(Pro-Phe)、cyclo-(Pro-Val)的含量,将这 2 种环二肽成分按在Fr.1 部位中的摩尔比例混合后体外给药,结果表明,这 2 种环二肽成分的组合物能显著抑制LPS诱导的RAW264.7 细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平.结论 环二肽类成分是清半夏主要起抗炎作用的物质基础类别之一.
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