CD74基因表达对急性髓系白血病细胞增殖与侵袭的抑制作用
Inhibitory effect of CD74 gene expression on proliferation and invasion of acute myeloid leukemia cells
摘要目的:探讨白细胞分化抗原74(CD74)基因表达对急性髓系白血病(AML)细胞增殖、侵袭及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响.方法:收集83例AML患者的骨髓样本(AML组)、25例正常供者的骨髓样本(对照组)及人AML细胞系HL60、MOLM-13、THP-1、U-937、人原代正常骨髓单个核细胞(BM-MC)为研究对象,Western blot检测AML骨髓样本及各细胞系中CD74蛋白表达;利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对MOLM-13细胞进行转染,并分为空白组(细胞不进行转染)、si-NC组(将si-NC转染于细胞)、si-CD74组(将si-CD74转染于细胞);Western blot检测各组细胞中CD74、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及MIF/ERK信号通路相关蛋白MIF、磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶(p-ERK)、ERK表达水平;CCK-8法检测各组MOLM-13细胞在0、24、48、72 h的增殖情况;Transwell实验检测各组MOLM-13细胞侵袭情况.结果:与对照组比较,AML组骨髓细胞中CD74蛋白表达水平显著升高(P<0.05),CD74蛋白在HL60、MOLM-13、THP-1、U-937细胞系中均高表达,且在MOLM-13细胞系中表达量最高.与空白组和si-NC组比较,si-CD74组MOLM-13细胞的OD450值(在24、48、72 h时)、细胞侵袭数目、CD74、MMP-9、MIF和p-ERK蛋白表达显著降低(P均<0.05),但空白组与si-NC组比较,差异无统计学意义(P均>0.05).结论:干扰AML细胞中CD74表达,可抑制细胞增殖与侵袭,其作用机制可能与抑制MIF/ERK信号通路有关.
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