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砷对雄性大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响

Effects of Arsenic on Protein Expression Levels of AQP-8 and Survivin in Testicular Tissues of Male Rats

摘要[目的]研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸组织AQP-8 及survivin蛋白表达的影响.[方法]将 40 只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组以及低、中、高剂量砷染毒组,每组 10 只;采用自由饮水方式染毒,低、中、高剂量染毒组饮水中亚砷酸钠浓度分别为 2.4、12.0、60.0 mg/L,连续染毒 15 周,对照组饮用蒸馏水;染毒试验结束后,对各组大鼠进行精子计数,计算精子存活率;制备睾丸组织切片进行病理学观察;利用免疫组化及Western blotting法测定大鼠睾丸组织中AQP-8 及survivin蛋白的表达水平.[结果]与对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠精子计数与精子存活率均降低,且差异显著(P<0.05).低剂量染毒组大鼠生精小管无明显变化;中剂量染毒组大鼠生精上皮层数减少,小管间隙增宽;高剂量染毒组大鼠部分生精小管出现基膜溶解,生精上皮细胞层次紊乱,细胞间隙增大,间质出现水肿、渗出.免疫组化分析结果显示,AQP-8 蛋白主要表达于各级生精细胞的细胞膜和精子细胞,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中AQP-8 阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)升高;survivin蛋白主要表达于次级精母细胞和精子细胞的胞浆,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中survivin阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)降低.Western blotting分析结果显示,对照组和各剂量染毒组大鼠睾丸组织中均存在AQP-8 及survivin蛋白的表达;与对照组相比,低、中、高剂量染毒组AQP-8 蛋白表达量显著(P=0)增加,survivin蛋白表达量显著(P=0)降低.[结论]砷暴露使睾丸组织AQP-8 蛋白表达量增加,survivin蛋白表达量下降,这可能是导致其雄性生殖毒性效应的机制之一.

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