换一批eEF-2K基因沉默对肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响
EFFECTS OF eEF-2K GENE SILENCING ON PROLIFERATION,INVASION AND APOPTOSIS OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA CELLS
摘要目的 检测eEF-2K基因在肝细胞癌(HCC)组织内的表达并分析其表达水平对HCC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 用RT-qPCR和Western Blot检测了64例肝癌组织及癌旁肝组织,5种HCC细胞系LM3、Hep3B、Huh7、97H、HepG2及人正常肝细胞系LO2中eEF-2K基因在mRNA及蛋白水平的表达.用eEF-2K特异性siRNA沉默LM3及Hep3B细胞性中eEF-2K基因后,经qPCR检测确认.随后用CCK-8、Transwell方法及流式细胞技术检测eEF-2K基因沉默对增殖、侵袭与凋亡的影响.结果 相较癌旁组织,HCC组织内eEF-2K mRNA与蛋白表达显著上调,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常人肝细胞系LO2相比,肝癌细胞系LM3、Hep3B、97H、HepG2、Huh7中的eEF-2K mRNA和蛋白表达分别升高,差异有统计学意义(P＜0.05).在LM3及Hep3B细胞系中用特异性siRNA沉默eEF-2K后,与非特异性siRNA对照组相比,细胞增殖活性和侵袭能力显著降低(P＜0.05),凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).TCGA数据库分析结果表明eEF-2K高表达与肝癌预后不良相关,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 eEF-2K蛋白在肝癌组织和细胞中高表达且与预后不良相关;沉默eEF-2K后肝癌细胞增殖和侵袭能力降低并诱发凋亡,提示eEF-2K可用作HCC潜在的预后标志物和治疗靶点.
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