miR-638促进急性髓性白血病增殖作用机制的研究

Studyon The Mechanism of miR-638 Role in Promoting Proliferation in Acute Myeloid Leukemia

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摘要目的探讨miR-638促进急性髓性白血病(AML)增殖的作用机制.方法通过培养HL-60细胞系,应用Lipofectamine 2000脂质体将miR-638模拟物(mimic)、miR-638抑制物(inhibitor)及阴性对照组(NC)转染至白血病细胞系HL-60,采用RT-qPCR验证miR-638的转染效果,采用CCK8实验检测miR-638对细胞增殖能力的影响,采用AnnexinV/PI双染流式细胞术实验检测miR-638对白血病细胞凋亡的影响,采用Western blot实验检测MCTS1的表达水平.结果与NC相比,miR-638模拟物转染HL-60细胞后水平升高,miR-638抑制物转染HL-60细胞后水平降低,差异具有统计学意义(P＜0.05),转染效果较好.与NC相比,miR-638模拟物转染至HL-60细胞后,细胞增殖水平明显降低;miR-638抑制物转染至HL-60细胞后,细胞增殖水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).AnnexinV/PI双染流式细胞术实验发现,与NC相比,转染miR-638模拟物后HL-60细胞凋亡率显著升高,转染miR-638抑制物后HL-60细胞凋亡率显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).miR-638模拟物可显著降低HL-60细胞内MCTS1的表达水平,miR-638抑制物可显著增加HL-60细胞内MCTS1的表达水平,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-638低表达可促进AML的增殖能力,并抑制细胞凋亡;其调控机制可能是通过结合致癌基因MCTS1共同促进白血病的发生.