换一批摘要目的:探究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)在斑马鱼视网膜针刺损伤后的表达及其在视网膜再生中的作用.方法:(1)通过定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测视网膜损伤后HDACs的mRNA表达水平;(2)5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)免疫荧光分析视网膜Müller细胞(Müller glia,MG)和祖细胞(MG-derived progenitor cells,MGPCs)的增殖;(3)利用在去分化MG中特异表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的Tg(1016tuba1a:GFP)转基因斑马鱼检测MG细胞的去分化;(4)通过BrdU谱系追踪MGPCs并进行增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫荧光分析MGPCs的细胞周期进程;(5)qPCR检测抑制HDACs后视网膜内细胞周期相关基因的表达变化.结果:(1)视网膜损伤后多个hdac基因表达发生改变;(2)使用HDACs抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)或丙戊酸(valproic acid,VPA)均显著抑制损伤后第4天MGPCs的形成;(3)HDACs不参与MG的去分化,但MG的增殖需要HDACs;(4)抑制HDACs显著影响了MGPCs的细胞周期进程和细胞周期相关基因表达.结论:HDACs促进视网膜损伤后MG和MGPCs的增殖,在自发性视网膜再生中发挥必要作用.
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