换一批
换一批迁移侵袭抑制蛋白MIIP的GST融合蛋白表达及生物学活性鉴定
Expression and Biological Activity Determination of Migration and Invasion Inhibitor Protein-GST Fusion Protein
摘要目的 构建人MIIP蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及生物学活性鉴定.方法 RT-PCR扩增得到人MIIP基因全长编码序列,采用重组DNA技术将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建获得重组原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP,经酶切鉴定及测序验证完全正确后,将其转化至大肠杆菌BL21细胞中,用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经纯化获得目的 蛋白,用Western blot鉴定所得融合蛋白.结果 构建了pGEX-4T-1-MIIP原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了GST-MIIP融合蛋白,经Glutathione Agarose纯化和Western blot检测,证实所得GST-MIIP融合蛋白具有生物学活性.结论 成功获得了有生物学活性的GST-MIIP融合蛋白.
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