MAPK1基因沉默对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

Effect of MAPK1 Gene Silencing on Proliferation,Apoptosis,Migration and Invasion of Lung Cancer A549 Cells

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摘要目的探讨丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinases1,MAPK1)基因沉默对肺癌A549细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响.方法利用CRISPR/CAS9基因编辑技术构建MAPK1沉默细胞系,采用Real-time PCR和Western blot检测沉默MAPK1后mRNA和蛋白表达水平.将MAPK1沉默载体与空载体转染至肺癌A549细胞中,并分为MAPK1沉默组、空载体组和空白组.对各组的肺癌A549细胞进行培养,利用CCK-8实验检测细胞增殖能力;平板集落形成实验检测细胞集落形成能力;平板划痕实验和Tran-swell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡和周期情况以及Western blot实验检测MAPK1沉默后ERK/mTOR通路蛋白表达.结果 Real-time PCR和Western blot结果表明成功构建肺癌A549细胞MAPK1沉默细胞系.MAPK1沉默使肺癌A549细胞增殖能力减弱(P<0.05),迁移和侵袭能力降低(P<0.05),细胞凋亡率增加且细胞周期被阻滞于S期(P<0.05).MAPK1沉默后,ERK/mTOR通路信号分子mTOR、PRAS40、EIF4EBP1、MEK2的总蛋白和磷酸化蛋白表达均降低(P均<0.05).结论沉默MAPK1可抑制肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期.