孕酮在颗粒细胞中通过cAMP/PKA信号通路影响卵母细胞发育
Progesterone Affects Oocyte Development Through cAMP/PKA Signaling Pathway in Granulosa Cells
摘要目的 探究孕酮在颗粒细胞中影响卵母细胞发育的分子机制.方法 将人卵巢颗粒细胞(KGN)用不同浓度孕酮(P4)(0、1000、2000、3000 ng·mL-1)处理之后,RT-PCR和Western blot法检测不同浓度P4 处理后卵泡刺激素受体(FSHR)和干细胞因子(SCF)的表达情况;用rFSH、H-89、forskolin、forskolin+H-89、P4+H-89 和P4分别处理KGN细胞后,RT-PCR和Western blot法检测SCF的基因及蛋白表达情况;CCK-8 法检测不同浓度P4 处理后的细胞存活率;Western blot法检测不同浓度P4 处理后Caspase3、Bcl-2、Bax 相关凋亡蛋白的表达情况.结果 用不同浓度P4(0、1000、2000、3000 ng·mL-1)处理之后,FSHR和SCF的基因和蛋白的相对表达量均下降(P均<0.05).用rFSH、H-89、forskolin、forskolin+H-89、P4+H-89和P4分别处理KGN细胞后,显示P4可以下调forskolin诱导的SCF的表达.P4 抑制颗粒细胞系KGN细胞的存活率,并促进Caspase3、Bcl-2、Bax相关凋亡蛋白的表达.结论 P4通过cAMP/PKA通路影响颗粒细胞中SCF的表达,并且抑制细胞的存活,促进细胞凋亡.
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