换一批
换一批蛋白激酶D3血管内皮细胞条件性敲除小鼠的构建及表型分析
Construction and Phenotypic Analysis of Protein Kinase D3 Vascular Endothelial Cell Conditional Knockout Mice
摘要目的 构建Prkd3血管内皮细胞条件性敲除小鼠并分析其表型,探讨血管内皮细胞上Prkd3条件性敲除小鼠的敲除效率及可能的表型.方法 利用Cre/LoxP系统构建血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠模型,即分别构建Prkd3flox/flox小鼠和Cdh5-Cre工具小鼠,再将两者进行交配,筛选得到Prkd3血管内皮条件性敲除小鼠(Cdh5-Cre;Prkd3flox/flox,简称Prkd3△EC).在血管内皮细胞内特异性敲除Prkd3,通过鼠尾PCR法进行基因型鉴定;分离肝血窦内皮细胞并用Western blot检测敲除效率,通过功能学及组织病理学方法评估内皮细胞中Prkd3缺失对肝脏的影响.结果 成功构建Prkd3△EC,敲除效率大于90％.表型分析发现,Prkd3△EC小鼠表现出自发性肝纤维化,随年龄增长逐渐加重(P＜0.05);通过HE染色和天狼星红染色发现肝脏中胶原纤维增多,血管周围的纤维成分明显增多(P＜0.05).表明血管内皮细胞中Prkd3缺失能够诱发自发性肝纤维化.结论 成功构建了Prkd3△EC,该条件性敲除小鼠的肝脏存在自发性肝纤维化情况.
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关键词
Prkd3血管内皮细胞条件性敲除小鼠Cre/LoxP系统肝纤维化Prkd3vascular endothelial cell conditional knockout miceCre/LoxP systemliver fibrosis
分类号
R394.3
栏目名称
基础医学
DOI
10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2024.09.002
发布时间
2024-11-11
基金项目
宁夏自然科学基金项目
国家自然科学基金
中国科学院“西部之光”人才培养引进计划
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