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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯经cGAS/STING/NF-κB信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞衰老的机制

Monobutyl Phthalate and Mono-2-ethylhexyl Phthalate Induce Cellular Senescence in Mouse Leydig Cells by cGAS/STING/NF-κB Signaling Pathway

摘要目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)经环磷酸鸟苷-腺苷合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)/核因子-κB(NF-κB)信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)衰老的机制.方法 对TM-3细胞分别进行400 μmol·L-1的MBP、MEHP单药处理及400 μmol·L-1 MBP+400 μmol·L-1 MEHP联合处理24 h后,光学显微镜下观察细胞形态,活性氧(ROS)检测以说明发生氧化应激,β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色法检测细胞衰老程度,qPCR检测线粒体DNA(mtDNA)是否释放进入细胞质,RT-qPCR及Western blot分别检测cGAS、STING、p65、p-p65、P16及P21的mRNA及蛋白表达量.结果 相比于对照组,MBP和MEHP染毒TM-3细胞出现扁平状态、空泡扩大,细胞发生皱缩.细胞内ROS水平升高,SA-β-Gal活性增加,mtDNA拷贝数增加,cGAS、STING、NF-κB、P16、P21的mRNA水平及蛋白水平均升高(P均<0.05);MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的ROS含量、SA-β-Gal活性、mtDNA拷贝数、衰老相关基因及蛋白表达水平具有拮抗作用(P均<0.01).结论 MBP和MEHP可能通过cGAS/STING/NF-κB信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞衰老,且表现为拮抗作用.

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