microRNA-214-3p靶向ATG13调控胃癌自噬的机制研究
MicroRNA-214-3p Regulates Autophagy in Gastric Cancer by Targeting ATG13
摘要目的 研究microRNA-214-3p(miR-214)对胃癌细胞自噬的影响,并阐明其调控机制.方法 将慢病毒LV-miR-214 inhibitor和空慢病毒载体LV-NC分别转染人胃癌细胞株AGS,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定转染的人LV-AGS-NC和LV-AGS-miR-214 inhibitor中miR-214的表达水平;通过透射电镜和免疫荧光观察miR-214对胃癌细胞自噬的影响;蛋白印迹实验检测不同转染组细胞中ATG5、LC3 Ⅱ的表达水平;通过qRT-PCR、蛋白印迹实验及荧光素酶报告基因实验验证miR-214与ATG13的靶向关系.结果 AGS细胞转染慢病毒LV-miR-214 inhibitor后,miR-214的表达较阴性NC组降低(P<0.05);透射电镜结果显示,下调miR-214后胃癌细胞的自噬小体减少;免疫荧光观察下调miR-214后LC3荧光斑点减少;蛋白印迹实验显示,抑制miR-214表达后ATG5、LC3 Ⅱ的表达降低,ATG13的表达升高;qRT-PCR实验显示,抑制miR-214表达后,ATG13的表达升高;荧光素酶报告基因实验表明miR-214靶向ATG13.结论 miR-214可能通过靶向ATG13促进胃癌细胞自噬,从而影响胃癌的进展.
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