换一批
换一批不同的核酸提取方法在布鲁氏菌检测中的应用评价
Application of different nucleic acid rapid extraction method in the detection of Brucella abortus evaluated
摘要目的 比较不同核酸提取方法对布鲁氏菌检出率的影响,为布鲁氏菌核酸快速提取检测提供技术参考.方法 分别使用磁珠法、直接裂解法和高温裂解法对感染布鲁氏菌患者的20 例全血样本、10 例关节腔及浆膜腔积液样本进行核酸提取,然后进行实时荧光RT-PCR检测,采用SPSS 22.0 对结果进行统计分析,评价该核酸快速提取试剂的DNA提取效率.结果 磁珠法阳性检出率为 100%,Ct值中位数为 29.17(21.19～31.33),批内变异系数(CV)最高为1.33%.直接裂解法阳性检出率为63.33%,Ct值中位数为33.29(28.69～34.54),批内CV最高为1.28%.高温裂解法阳性检出率为100%,Ct值中位数为30.26(26.63～33.85),批内CV最高为1.21%.高温裂解法和磁珠法检出率比较差异无统计学意义(P>0.05),直接裂解法检出率显著低于磁珠法和高温裂解法(P<0.05).结论 核酸快速提取试剂在高温裂解条件下可保证核酸提取效率和重复性稳定,具有操作简单、检测时间短、降低实验室生物安全风险等优势,可以应用于布鲁氏菌的核酸检测.
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关键词
布鲁氏菌核酸快速提取磁珠法实时荧光RT-PCRBrucellaNucleic acid rapid extractionMagnetic bead methodReal-time fluorescent RT-PCR
分类号
R372
栏目名称
实验研究
DOI
10.13621/j.1001-5949.2024.07.0614
发布时间
2024-08-09
基金项目
宁夏回族自治区重点研发项目
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