离体癫痫持续状态模型中抑制miR-134对树突棘的影响
The role of miR134 in remodeling of dendritic spines in status epilepticus model in vitro
摘要目的 探讨抑制miR-134对原代培养神经元树突棘的影响.方法 ①构建大鼠miR-134抑制慢病毒载体并验证;②培养海马神经元,建立无镁离体癫痫持续状态SE模型,利用离子扫描显微镜研究miR-134抑制对癫痫持续状态SE模型中神经元树突棘密度的影响.结果 ①将一段362bp包含2个miR-134竞争结合位点的DNA片段经XhoI和EcoRI酶切后插入质粒pCDH-CMV-MCS-EG(R)FP-MCS中E(R)GFP序列的下游,该片段转录产物与miR-134互补形成稳定的复合物,从而阻止了miR-134对靶mRNA的降解或翻译抑制,得到大鼠miR-134抑制慢病毒载体;②同对照病毒组相比,miR-134抑制慢病毒预处理组经无镁细胞外液处理后(离体癫痫持续状态模型)神经元树突棘密度减少(P<0.05).结论 MiR-134可能在树突棘重塑过程中扮演重要角色.
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