摘要目的 研究小鼠大脑中动脉栓塞后脑缺血模型中,富亮氨酸α2糖蛋白1(leucine-rich alpha-2-glycoprotein 1,LRG1)与转化生长因子beta 1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)是否存在着一定的表达,其表达的部位,以及其在脑缺血不同时间点的表达变化情况.方法 选用成年雄性C57BL/6小鼠为实验动物(体质量20~25g),小鼠被随机分为对照组和永久性大脑中动脉栓塞(permanent occlusion of middle cerebral ischemia,pMCAO)组,对照组是假手术组.应用改良Longa线栓法pMCAO模型.小鼠于取材前进行Longa评分,评分1~3分的小鼠可以入组,并且分别在相应的时间点:12h,24h,48h,3d和7d时取材脑组织,在每个时间段收集脑缺血样本作为实验组织,进行苏木精-伊红染色,观察小鼠脑缺血后脑组织的形态学变化,通过免疫组织化学染色观察LRG1和TGF-β1的表达位置,以及蛋白印迹分析LRG1和TGF-β1两者的变化趋势.结果 通过观察苏木精-伊红染色后,小鼠脑缺血后的脑组织存在炎性细胞浸润及神经元的缺失,免疫组织化学染色后细胞的形态学显示,LRG1蛋白主要为胞浆表达,且表达于微血管的内皮细胞中,在星形胶质细胞中也有表达.TGF-β1主要分布于细胞核中.蛋白印迹结果显示LRG1蛋白的表达在12h开始逐渐增多,至第3天达到高峰,保持一个高于对照组的水平直到pMCAO模型后的第7天(P<0.05).TGF-β1蛋白的表达在12h逐渐增多,至第3天达到高峰,至pMCAO模型后的第7天呈现下降趋势(P<0.05).受体LRG1的活性变化呈现与TGF-β1的表达基本相同的趋势.结论 LRG1以细胞浆表达为主,TGF-β1表达以细胞核为主;pMCAO模型梗死灶周围有LRG1和TGF-β1的表达,且表达趋势相一致.
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