换一批
换一批miR-410-3p 靶向 PTEN/Akt/mTOR 信号通路调控垂体瘤细胞的生物学活性
miR-410-3p targets the PTEN/Akt/mTOR signaling pathway to regulate the biological activity of pituitary tumor cells
摘要目的 探讨微小RNA(miRNA)-410-3p对垂体瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能作用机制.方法 将对数期人垂体瘤AtT-20细胞随机分为对照组(常规培养)、miR-410-3p mimcs 组(转染 miR-410-3p mimcs)、mimics-NC 组(转染 miR-410-3p mimcs-NC)、miR-410-3p inhibitor 组(转染 miR-410-3p inhibitor)和 inhibitor-NC 组(转染 miR-410-3p inhibitor-NC),MTT 法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT-qPCR检测细胞中miR-410-3p和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白(PTEN)mRNA表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-410-3p与PTEN的靶向关系,Western blot法检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PTEN、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达水平.结果 与对照组和 mimcs-NC 组比较,miR-410-3p mimcs 组细胞24、48 h OD490nm 值增加,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平升高,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平降低(P＜0.05);与对照组和 inhibitor-NC 组比较,miR-410-3p inhibitor 组细胞24、48 h OD490nm值减小,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平降低,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平升高(P＜0.05);与miR-410-3p mimcs 组比较,miR-410-3p inhibitor 组细胞24、48 h OD490nm 值减小,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平降低,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论 miR-410-3p可促进人垂体瘤AtT-20细胞增殖,抑制细胞凋亡,可能与靶向抑制PTEN表达,进而激活下游Akt/mTOR信号通路有关.
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