换一批莱菔硫烷对Nrf2原代星形胶质细胞Ⅱ相酶的诱导作用
Induction of the phase Ⅱ enzyme of Nrf2 primary astrocytes by sulforaphane
摘要目的 探索莱菔硫烷(SFN)对培养的Nrf2+/+、Nrf2-/-原代星形胶质细胞Ⅱ相酶的诱导作用.方法 取经基因鉴定的Nrf2+/+、Nrf2-/-新生乳鼠,取出大脑皮质分离培养原代星形胶质细胞,并进行纯化与鉴定.将细胞分为Nrf2+/+和Nrf2-/-组,每组又分为溶剂对照组和SFN药物干预组.通过给予不同浓度的SFN干预Nrf2+/+组细胞,测定Ⅱ相酶的表达来选择最佳给药浓度.然后分别给予Nrf2+/+、Nrf2-/-组DMSO和最适浓度的SFN,通过Western blot测定Ⅱ相酶的表达.结果 不同浓度SFN干预Nrf2+/+星形胶质细胞显示,10μmol·L-1对Ⅱ相酶Gclm、Nqo1、Ho1蛋白表达的诱导作用最强,为最佳给药浓度.Nrf2+/+和Nrf2-/-细胞分别给予10μmol·L-1 SFN处理后,Ho1均能明显上调.Nqo1和Gclm只在Nrf2+/+细胞中明显上调,在Nrf2-/-细胞中不上调.而对于Gss和Gclc,给药后Nrf2+/+和Nrf2-/-细胞两种酶表达均无明显变化.结论 SFN对原代培养的星形胶质细胞Ho1的诱导不完全依赖于核转录因子Nrf2;对Nqo1、Gclm的诱导很大程度上依赖于转录因子Nrf2;对Gss和Gclc的表达无明显诱导作用.
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