摘要目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)核富集丰度转录物1(NEAT1)对慢性脑低灌注(CCH)大鼠认知障碍的调控作用和潜在机制.方法 双侧颈总动脉闭塞术(BCCAO)诱导CCH模型大鼠.将大鼠分为5组(每组n=10):Ⅰ组(假手术组);Ⅱ组(BCCAO手术组);Ⅲ组[BCCAO后于海马区注射 0.3 mg·kg 1·w-1 的沉默 lncRNA NEAT1 的短发夹 RNA 重组质粒(shNEAT1),持续 12 w];Ⅳ组[BCCAO后于海马区每周注射0.3 mg·kg-1·w-1的shNEAT1和50 mg·kg 1·w-1的沉默克洛托蛋白(Klotho)的短发夹RNA重组质粒(shKlotho),持续12 w];V组[BCCAO后于海马区注射0.3 mg·kg-1·w-1的shNEAT1和25mg·kg-1哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的抑制剂(AZD-8055),持续12 w].行Morris水迷宫实验记录逃避潜伏期.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测lncRNA NEAT1的表达.Western blot法检测Klotho、mTOR、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、神经核抗原(NeuN)、多聚腺苷酸核糖聚合酶(PARP)、半胱天冬酶-3(caspase-3)、切割模式的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)的表达.免疫荧光化学检测海马区NeuN阳性细胞数.结果 与Ⅰ组比,Ⅱ组大鼠的逃避潜伏期延长,lncRNA NEAT1、PARP、cleaved-caspase-3的表达均上调,NeuN、Klotho和p-mTOR的表达均下调,NeuN阳性的细胞数减少(均P＜0.05).与Ⅱ组比,Ⅲ组大鼠的逃避潜伏期缩短,且海马组织中lncRNA NEAT1、PARP、cleaved-caspase-3的表达均下调,NeuN、Klotho和p-mTOR的表达均上调,NeuN阳性的细胞数增加(均P＜0.05).与Ⅲ组比,Ⅳ组和V组中大鼠的逃避潜伏期延长,且海马组织中PARP、cleaved-caspase-3的表达均上调,NeuN、Klotho和p-mTOR的表达均下调,NeuN阳性细胞数都减少(均P＜0.05).结论 lncRNA NEAT1通过负调控Klotho/mTOR轴促进CCH大鼠的认知障碍,为研究CCH的有效治疗靶点提供理论依据.