摘要目的 探讨抗衰老基因Klotho对慢性脑低灌注(CCH)大鼠认知障碍的改善作用及对海马区神经元铁死亡和氧化应激的影响和潜在调控机制.方法 使用双侧颈总动脉永久性闭塞术(2-VO)建立CCH大鼠,并将大鼠分为5组(每组n=10),其中包括假手术组、CCH组、重组Klotho蛋白(Klotho)+CCH组(重组Klotho蛋白海马区注射10 mg·kg·w-1,x4w)、生理盐水+CCH组(生理盐水海马区注射2(mg·kg·w-1,x4w)、Klotho+阿卡地新(Acadesine,AICAR)+CCH 组(Klotho 蛋白 10 mg·kg·w-1,x4w和AICAR 1.5 mg·kg·w-1,x4w海马区联合注射)e 4 w后行Morris水迷宫实验检测各组大鼠的逃避潜伏期.随后安乐死大鼠,取海马组织.Western blot法检测海马组织中单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的AMPK(p-AMPK)、磷酸化的(p-mTOR)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白Tau、神经元特异核蛋白(NeuN)的表达水平.ELISA试剂盒检测海马组织中的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.结果 与假手术组比,CCH组的逃避潜伏期延长(P＜0.05),p-AMPK、MDA、NSE、Tau、ROS 的水平显著增加(均P＜0.05),但 p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1 的水平显著下调(均P＜0.05).与CCH组比,生理盐水+CCH组的逃避潜伏期以及海马区p-AMPK、p-mTOR、MDA、ROS、SOD、GSH、GPX4、NSE、Tau、NeuN、FSP1 的水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).与CCH组或生理盐水+CCH组比,Klotho+CCH组的逃避潜伏期缩短(均P＜0.05),p-AMPK、MDA、ROS、NSE、Tau 的水平显著下调(均P＜0.05),但 p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1 的水平显著上调(均P＜0.05).与 Klotho+CCH 组比,Klotho+AICAR+CCH 组的逃避潜伏期延长(P＜0.05),p-AMPK、MDA、ROS、NSE、Tau 的水平显著增加(均P＜0.05),但 p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1 的水平显著下调(均P＜0.05).结论 Klotho通过激活AMPK/mTOR信号通路缓解CCH大鼠海马神经元的铁死亡和氧化应激.