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过表达α-Klotho蛋白对大鼠脑缺血损伤的康复效果和乳酸化修饰的调控研究

The study of the effects and regulation of overexpressed α-Klotho on the rehabilitation from ischemic brain injury and lactylation modification in rats

摘要目的 探讨过表达α-克洛索(α-Klotho)蛋白对大鼠脑缺血损伤的神经行为、脑组织病理变化、炎性因子水平、乳酸化修饰及凋亡相关蛋白的影响.方法 本研究将40只SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只:假手术组(Ⅰ组)、脑缺血损伤组(Ⅱ组)、脑缺血损伤+过表达空载体组(Ⅲ组)和脑缺血损伤+α-Klotho过表达组(Ⅳ组).脑缺血模型通过结扎大脑中动脉诱导,随后对各组大鼠进行悬吊时间、Zea-Longa评分、Grip test评分的检测;对脑梗死体积进行检测.另外,采用Western blot检测α-Klotho、脑源性神经营养因子(BDNF)、炎症因子[包括白细胞介素-1 β(IL-1 β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、乳酸化相关蛋白[己糖激酶2(HK2)、醛缩酶A(ALDOA)、乳酸脱氢酶A(LDHA)],以及凋亡相关蛋白[Bax/Bcl-2比值和切割型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase 3)]的表达量.结果 与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组的大鼠悬吊时间、Grip test评分、BDNF水平均下调,Zea-Longa 评分、脑梗死体积、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平、HK2、ALDOA、LDHA 蛋白表达量以及 Bax/Bcl-2比值和cleaved-caspase3蛋白的表达量均上调(均P<0.05);与Ⅲ组相比,Ⅳ组的大鼠悬吊时间、Grip test评分、BDNF水平、α-Klotho表达量以及HK2、ALDOA、LDHA蛋白的相对表达量显著上调,而Zea-Longa 评分、脑梗死体积、IL-1 β、IL-6、TNF-α水平、Bax/Bcl-2比值以及cleaved-caspase3蛋白的相对表达量显著下调(均P<0.05).结论 过表达α-Klotho能够改善脑缺血损伤大鼠的神经功能,减少脑梗死体积,降低炎症反应和乳酸化修饰,并抑制细胞凋亡.这表明α-Klotho可作为一种潜在而有效的治疗脑缺血损伤的策略.

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