换一批
换一批猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测
Detection of Antigenicity and Enzymatic Activity of Recombinant Inosine5-monophosphate Dehydrogenase(IMPDH)of Streptococcus suis Serotype 2
摘要通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(inosine 5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1 064 bp.PCR产物和pET28a载体分别经过EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impah,并转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中,经过1 mmol/L IPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD.表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性.蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0～9.0表现出较强酶活性,NADH A_(340)介于0.662～0.816之间.
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关键词
猪链球菌次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)克隆酶活性Streptococcus suis serotype 2inosine 5-monophosphate dehydrogenase(IMPDH)cloningenzymatic activity
分类号
S188
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2009.06.001
发布时间
2010-03-26
基金项目
国家重点基础研究发展规划(973计划)（2006CB504403）；
江苏省自然科学基金（BK2007124）
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