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鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的瞬时表达及其抗病毒活性检测

Transient Expression of Chicken Interferon Gamma Gene (ChIFN-γ) and Determination of Its Antiviral Activity

摘要采用PCR技术从质粒pET-ChIFN-γ中扩增得到鸡(Gallus gallus)γ-干扰素(chicken interferon gamma,ChIFN-γ)基因,将其亚克隆到真核表达载体pCAGGS中.将鉴定正确的克隆命名为pCAGGS-ChIFN-γ,体外转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,24 h后经间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)检测,表达蛋白具有良好的免疫原性.然后利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水疱口炎病毒(VSV*GFP)在CEF细胞上检测表达的ChIFN-γ抗病毒活性(AVA),经检测其抗病毒活性为2×10~3AU/mL,并且其活性可被抗鸡IFN-γ的多克隆抗体阻断.

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作者 殷喆 [1] 张文龙 [1] 陈伟业 [2] 刘胜旺 [2] 步志高 [2] 王君伟 [3] 吴东来 [1] 学术成果认领
作者单位 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家兽医生物技术重点实验室,农业部兽医公共和卫生重点开放实验室,哈尔滨,150001 [1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家兽医生物技术重点实验室,农业部兽医公共和卫生重点开放实验室,哈尔滨,150001 [2] 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030 [3]
分类号 S188
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.06.003
发布时间 2010-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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