换一批甘蔗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGPase)转化拟南芥及转基因植株的生理特性分析
Transformation of UDP-glucose Pyrophosphorylase Gene (UGPase) from Saccharum officinarum into Arabidopsis thaliana and Analysis of Physiological Characteristics of Transgenic Plants
摘要尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)是植物糖代谢的主要参与酶之一,在植物的生长发育过程中起着重要作用.本研究将甘蔗(Saccharum officinarum)UGPase基因cDNA片段连接至载体pBI121,通过BamH Ⅰ和SacⅠ酶切鉴定及测序验证,结果表明,植物表达载体成功构建；通过农杆菌(A grobacterium tumeefaciens)的介导,采用浸花法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana).结合卡那霉素抗性筛选和PCR检测,获得了5株T0代转基因植株.对T1代转基因植株进行PCR及Southern blot分析,结果表明,目的基因已成功转入拟南芥中,并且不同的转化植株含有目的基因的拷贝数不同.对T2代转基因植株进行PCR和RT-PCR检测,结果表明,目的基因不仅能在自交系后代中稳定遗传,而且在RNA水平也有表达.同时,对T2代转基因植株的可溶性总糖、蔗糖及淀粉含量进行测定,结果表明,与野生型相比,转基因植株中可溶性总糖含量没有明显的变化,但蔗糖含量有所提高,并且差异明显,比野生型植株提高了50.85％～96.99％,而淀粉含量都较野生型植株的低,降低了9.69％～36.76％.说明UGPase在蔗糖与淀粉的转换过程中起着较为重要的作用,其催化的反应方向影响着组织中这两种产物(蔗糖和淀粉)的分配.
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分类号
S566.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2012.05.003
发布时间
2012-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30871575）
现代农业产业技术体系建设专项（CARS-20-4-4）
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