换一批
换一批摘要脂质运载蛋白(lipocalin)是一类广泛存在于生物界的小分子蛋白质家族,具备一些抗体所没有的优点.为了构建库容量大、多样性好的核糖体展示模拟抗体Anticalin文库,本研究以脂质运载蛋白家族之一大菜粉蝶(Pieris brassicae)中提取到的胆汁三烯结合蛋白基因(bilin-binding protein, bbp)(GenBank登录号:X76568.1)为模板,设计了包含16个随机突变位点的引物,采用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)构建bbp基因文库.然后,利用SOE-PCR法引入核糖体展示元件(T片段与P片段),体外构建核糖体展示模拟抗体Anticalin基因文库.结果表明,本研究成功构建了模拟抗体Anticalin基因文库,其库容达到3.76× 1023,文库的可扩增性、完整性及多样性良好,为筛选多种小分子化学残留的模拟抗体提供了基础资料.
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关键词
核糖体展示Anticalin基因文库胆汁三烯结合蛋白基因(bbp)脂质运载蛋白T7启动子Ribosome displayAnticalin libraryBilin-binding protein gene (bbp)LipocalinT7 promoter
栏目名称
研究资源与技术改进
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2014.09.014
发布时间
2014-10-21
基金项目
国家自然科学基金
天津市应用基础与前沿研究计划重点项目
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