烟草NtNRAMP2基因的鉴定及其在镉吸收中功能分析
Identification of NtNRAMP2 Gene and Its Function Analysis in Cadmium Absorption in Nicotiana tabacum
摘要自然抗性相关巨噬细胞蛋白(natural resistance associated macrophage proteins,NRAMPs)在金属跨膜转运中起重要作用.为了研究烟草(Nicotiana tobacum)NRAMP基因在重金属镉(Cd)吸收和转运中的作用,本研究从栽培烟草'K326'中克隆到1个NRAMP亚家族基因,命名为NtNRAMP2(GenBank No.OP972862);对其进行生物信息学分析和亚细胞定位,并使用qPCR分析其组织表达特异性、外源Cd、脱落酸(abscisic acid,ABA)以及乙烯处理的表达情况.结果表明,NtNRAMP2基因CDS全长为1629 bp,编码542个氨基酸,包含4个外显子和10个跨膜结构域.进化分析显示其与番茄(Lycopersicon esculentum)和马铃薯(Solanum tuberosum)亲缘关系最近,亚细胞定位于内质网和液泡中.qPCR结果显示,NtNRAMP2基因在烟草不同组织中均有表达,但在根中表达量最高.在不同浓度和时间镉胁迫诱导下,NtNRAMP2表达量都显著升高(P<0.05),外源ABA和乙烯都能诱导烟草根中NtNRAMP2基因表达.同时,构建NtNRAMP2 过表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导转化烟草'K326'并获得 18 株NtNRAMP2过表达转基因烟株.本研究为进一步探讨NtNRAMP2基因功能提供了参考.
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