换一批
换一批胚胎期Wnt3a基因特异性敲降对小鼠大脑神经发生的影响
Effect of the specific knockdown of Wnt3a in embryonic stage on neurogenesis in mouse brain
摘要目的 研究胚胎期第13天(E13)特异性敲降Wnt3a基因对小鼠大脑神经发生的影响.方法 利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证Wnt3a在脑皮质神经干细胞中的敲降率.通过子宫内电穿孔实验在E13时将Wnt3a-shRNA质粒电转到胎鼠大脑皮质中,从而下调Wnt3a在脑皮质神经干细胞中的表达.在E16时收取小鼠脑组织,进行免疫荧光染色检测,观察下调Wnt3a后小鼠脑组织中神经元发育进程的改变.结果 RT-qPCR结果显示,神经干细胞中Wnt3a敲降后其mRNA表达水平降低54％,与对照组相比差异具有统计学意义(t=11.260,P＜0.001).免疫荧光染色结果显示,Wnt3a下调导致大脑皮质的皮质板(CP)中的绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞比例降低,大脑中间带(IZ)的GFP阳性细胞比例上升,差异均具有统计学意义(t=4.400、4.482,P＜0.01).结论 E13时特异性下调小鼠脑中Wnt3a基因导致GFP荧光分布异常,神经发生过程受到干扰.
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关键词
Wnt3A蛋白质小鼠,基因敲除神经发生大脑皮质胚胎发育电穿孔Wnt3A proteinmice,knockoutneurogenesiscerebral cortexembryonic developmentelectroporation
栏目名称
DOI
10.11712/jms.2096-5532.2024.60.051
发布时间
2024-08-27
基金项目
国家自然科学基金（32230040）
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