circPCMTD1对AML细胞恶性行为影响及机制

Effect of circPCMTD1 on malignant behavior of acute myeloid leukemia cells and its mechanism

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摘要目的探讨circPCMTD1对急性髓系白血病(AML)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制.方法体外培养人骨髓基质细胞系HS-5与AML细胞系HL-60、THP-1、U-937和Kasumi-1.将THP-1细胞随机分为 NC 组、si-NC 组、si-circPCMTD1 组、miR-328 NC 组、miR-328-3p 组和 si-circPCMTD1+anti-miR-NC/anti-miR-328-3p 组.采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)和 Western blot 法分别检测 circPCMTD1、miR-328-3p 表达量和相关蛋白的表达量;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯四唑溴化铵(MTT)法、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;并通过双荧光素酶报告实验评估circPCMTD1和miR-328-3p的关系.结果与HS-5细胞比较,circPCMTD1在AML细胞中高表达(F=66.258,P＜0.05),miR-328-3p则相反(F=101.145,P＜0.05).下调circPCMTD1抑制了细胞的增殖、迁移、侵袭及其相关蛋白表达,并诱导了细胞的凋亡(F=38.952～290.338,P＜0.05).上调 miR-328-3p 可削弱 WT-circPCMTD1 的荧光素酶活性,且下调 miR-328-3p可减弱circPCMTD1下调对细胞增殖的抑制作用(F=42.655,P＜0.05).结论沉默circPCMTD1可通过靶向miR-328-3p抑制AML细胞的生长.