黄柏碱对高糖诱导的晶状体上皮细胞自噬和凋亡影响
Effect of phellodendrine on the autophagy and apoptosis of lens epithelial cells induced by high glucose
摘要目的 探讨黄柏碱对高糖(HG)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)自噬和凋亡的影响及机制.方法 将HLEB3细胞随机分为对照组(A组)、HG组(B组)、黄柏碱组(C组)、Compound C(AMPK抑制剂)组(D组).应用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,活性氧荧光探针(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量,ELISA试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot法检测Bcl-2、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR 蛋白表达.结果 5 mg/L 为黄柏碱对 HLEB3 细胞最佳作用浓度.与A组比较,B组细胞活力、自噬体数量以及SOD、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bcl-2、p-AMPK/AMPK水平显著降低(F=30.857~213.971,P<0.001),细胞凋亡率及ROS、MDA、Bax、p-mTOR/mTOR水平显著升高(F=19.111~156.780,P<0.001);与 B 组相比,C 组细胞活力、自噬体数量以及 SOD、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bcl-2、p-AMPK/AMPK水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率及ROS、MDA、Bax、p-mTOR/mTOR水平显著降低(P<0.05);Compound C可逆转黄柏碱对HLEB3细胞自噬和凋亡的改善作用(P<0.05).结论 黄柏碱能减少HG诱导的LEC氧化应激和凋亡,促进细胞自噬,其作用机制可能与调节AMPK/mTOR信号通路有关.
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