换一批
换一批核因子E2相关因子2过表达对间充质干细胞抗缺氧和抗凋亡能力的影响
Effect of Nrf2 overexpression on anti-hypoxia and anti-apoptotic ability of mesenchymal stem cells
摘要目的 研究核因子E2相关因子2(Nrf2)对间充质干细胞(MSCs)的抗缺氧及抗凋亡能力的影响.方法 将过表达Nrf2的重组质粒及辅助质粒转染人胚肾细胞(293FT),获得过表达Nrf2的高滴度慢病毒.MSCs分别转染过表达Nrf2慢病毒以及空载体慢病毒,构建稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs(Nrf2过表达组)以及绿色荧光蛋白(GFP)-MSCs(对照组).采用荧光显微镜观察两组细胞的绿色荧光表达情况.采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测两组细胞中Nrf2蛋白的表达水平.采用光学显微镜观察两组细胞的抗缺氧能力,采用流式细胞术检测两组细胞的抗凋亡能力.结果 成功构建了稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs,Western Blot法检测结果显示Nrf2过表达组细胞的Nrf2蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01).缺氧处理15 h后,Nrf2过表达组的细胞活力明显高于对照组.流式细胞术检测表明Nrf2过表达组细胞的凋亡率为(30.9±1.4)%,明显低于对照组细胞的(61.3±1.3)%(P<0.05).结论 稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs在低氧环境中具有一定的抗缺氧、抗凋亡能力.
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关键词
核因子E2相关因子2(Nrf2)间充质干细胞(MSCs)慢病毒载体转染质粒凋亡缺氧流式细胞术人胚肾细胞缺血-再灌注损伤(IRI)Nuclear factor erythroid-2-related factor 2(Nrf2)Mesenchymal stem cells(MSCs)Lentiviral vectorTransfectionPlasmidApoptosisHypoxiaFlow cytometryHuman embryonic kidney cellIschemia-reperfusion injury (IRI)
分类号
R617
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-7445.2018.02.004
发布时间
2018-05-03
基金项目
国家十二五科技重大专项（2012ZX10002017-005、2012ZX10002016-023）；
广东省科技计划项目（2014B020228003、2014A020211015）；
广东省自然科学基金（2015A030312013、2015A030313038）；
广州市科技计划项目（201400000001-3、158100076、2014J4100183）
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