换一批转基因猪骨髓间充质干细胞的分离及与猪胰岛的共培养研究
Isolation of bone marrow mesenchymal stem cells in transgenic pigs and co-culture with porcine islets
摘要目的 探讨α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)、GTKO/人补体调节蛋白hCD46插入、单磷酸胞嘧啶-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)/GGTA1双基因敲除(Neu5GC/Gal)猪骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离培养,以及与猪胰岛共培养对胰岛的保护作用.方法 从不同转基因修饰GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪中提取骨髓,采用全骨髓法分离猪BMSC后进行培养.对BMSC进行形态学观察,并使用流式细胞术鉴定BMSC表面标志物.同时,观察BMSC诱导的多向分化,通过绿色荧光蛋白(GFP)转染标记猪BMSC来实现对BMSC的标记和示踪.将GFP转染标记的猪BMSC与猪胰岛细胞共培养,观察猪胰岛形态变化,与单纯猪胰岛细胞培养组进行比较.结果 猪来源的BMSC在体外培养时呈梭形,表达标志物CD29、CD44、CD73、CD90、CD105及CD166,不表达CD34、CD45,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化的能力;通过GFP转染标记的猪BMSC能够实现BMSC的标记和示踪,且在细胞分裂后的子代细胞中也能够稳定表达.猪BMSC对胰岛细胞有一定保护能力.结论 成功建立了 GFP标记的GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪来源的BMSC,其对胰岛细胞具有一定的保护能力.
更多相关知识
关键词
胰岛移植1型糖尿病间充质干细胞基因修饰猪分离鉴定共培养排斥反应Islet transplantationType 1 diabetes mellitusMesenchymal stem cellGenetically modified pigSeparationIdentificationCo-cultureRejection
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-7445.2023205
发布时间
2024-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览31
- 被引1
- 下载3
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
