摘要目的 探讨泛素特异性蛋白酶 46(USP46)在缺氧/复氧(H/R)诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用和机制.方法 将肾小管上皮细胞分为阴性对照沉默组(si-CTL组)、沉默USP46组(si-USP46组)、阴性对照沉默+H/R处理组(si-CTL+H/R组)和沉默USP46+H/R处理组(si-USP46+H/R组).流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,实时定量聚合酶链反应检测各组USP46、NOD样受体蛋白 3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-18、IL-1β信使RNA(mRNA)表达,蛋白质印迹法检测各组USP46、NLRP3、GSDMD、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(C-Caspase)-1蛋白表达.检测各组细胞上清中炎症因子和乳酸脱氢酶(LDH)表达情况,检测各组细胞活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)水平.采用免疫共沉淀验证USP46和NLRP3的蛋白结合情况.结果 与si-CTL组比较,si-CTL+H/R组细胞凋亡水平升高,USP46、NLRP3、GSDMD-N、C-Caspase-1蛋白表达水平升高,USP46、NLRP3、GSDMD、IL-18、IL-1β mRNA表达水平升高,IL-18、IL-1β、TNF-α、LDH水平升高,ROS、MDA增多(均为P<0.05);与si-CTL+H/R组相比,si-USP46+H/R组细胞凋亡水平降低,USP46、NLRP3、GSDMD-N、C-Caspase-1蛋白表达水平降低,USP46、GSDMD、IL-18 mRNA表达水平降低,IL-18、IL-1β、TNF-α、LDH水平降低,ROS、MDA水平降低(均为 P<0.05).免疫共沉淀结果显示USP46能够和NLRP3结合.结论 下调USP46能够减轻H/R诱导的肾小管上皮细胞焦亡,其机制可能是通过抑制USP46依赖性的NLRP3蛋白去泛素化水平,促进NLRP3泛素化降解.