摘要目的 探讨沉默调节蛋白 3(SIRT3)对人肾小管上皮细胞线粒体生物合成调控的分子机制.方法 通过不同浓度过氧化氢(H2O2)刺激细胞,将细胞分为4组:对照组(NC组)、50 μmol/L H2O2 组、110 μmol/L H2O2 组、150 μmol/L H2O2 组,检测H2O2 对SIRT3蛋白表达的影响.使用siRNA转染细胞,敲低SIRT3基因,并将细胞分为 5组:对照组(NC组)、阴性对照组(NCsi组)、SIRT3敲低组(siSIRT3组)、NCsi+H2O2 组和siSIRT3+H2O2 组.24 h后收集各组细胞检测细胞三磷酸腺苷(ATP)、线粒体超氧阴离子(O2?-)水平,线粒体SIRT3、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)、核呼吸因子 1(NRF1)、线粒体转录因子A(TFAM)、超氧化物歧化酶 2(SOD2)、乙酰化SOD2及细胞腺苷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)的表达水平.结果 110 μmol/L和 150 μmol/L H2O2 能降低细胞SIRT3蛋白表达水平(均为P<0.05).与NC组比较,NCsi组细胞ATP水平和线粒体O2?-差异均无统计学意义(均为P>0.05).与NCsi组比较,siSIRT3组O2?-水平升高,SIRT3蛋白表达水平下降,SOD2蛋白和乙酰化SOD2蛋白表达水平升高(均为P<0.05).与NCsi组比较,NCsi+H2O2 组细胞ATP水平下降,线粒体O2?-水平升高,SIRT3、SOD2、TFAM、AMPKα1、PGC-1α和NRF1蛋白表达水平均下降(均为P<0.05).与siSIRT3组比较,siSIRT3+H2O2 组细胞ATP水平下降,线粒体O2?-水平升高,SIRT3、SOD2、TFAM、AMPKα1、PGC-1α和NRF1蛋白表达水平下降,乙酰化SOD2蛋白表达水平下降(均为P<0.05).与NCsi+H2O2 组比较,siSIRT3+H2O2 组细胞ATP水平下降,线粒体O2?-水平升高,SIRT3、AMPKα1、PGC-1α和NRF1、TFAM蛋白表达水平下降,SOD2和乙酰化SOD2蛋白表达水平升高(均为P<0.05).结论 SIRT3通过调控AMPK/PGC-1α/NRF1和TFAM信号通路促进肾小管上皮细胞线粒体生物合成,是SIRT3改善氧化应激线粒体功能障碍的重要分子机制.