换一批摘要Irp2 基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因.为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2 基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2 基因序列,设计合成了一对特异性引物,以小肠结肠炎耶尔森菌ZDN6 菌株为研究对象,通过PCR技术扩增获得413 bp的irp2 基因片段,并进行了测序分析;随后将其克隆至pET28a(+)载体,转化入TOP10 感受态细胞,通过限制性酶切和测序对重组质粒进行验证;然后将鉴定正确的重组质粒pET28a(+)-irp2 导入BL21(DE)3 菌株中,通过IPTG促使融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析其表达水平.结果表明,pET28a(+)-irp2 原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌BL21(DE)3 中成功表达出irp2 基因,该融合蛋白的大小约为15 kDa.研究结果可为后期高致病性小肠结肠炎耶尔森菌的筛选、鉴定以及强毒力岛的致病机制等研究奠定基础.
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分类号
S852.61
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DOI
10.3969/j.issn.1003-7950.2025.03.005
发布时间
2025-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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