产金属β-内酰胺酶大肠埃希菌对亚胺培南的耐药性研究
Resistance of Escherichia coli producing metallo-β-lactamases to imipenem Depnrtnlent
摘要目的:分析产金属β-内酰胺酶大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南敏感性降低的原因.方法:用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析,采用E-test方法测定菌株及接合子和转化子的药敏情况.采用RT-PCR扩增和序列分析、碳青霉烯酶抑制剂增强实验、外膜蛋白分析(SDS-PAGE)以及羰酰氰氯苯腙(CCCP)抑制试验分析大肠埃希菌对亚胺培南耐药的原因.结果:菌株Eco1、Eco2和Eco3为非同一克隆株,对亚胺培南的MIC分别为 6 μg/mL、16 μg/mL和 16 μg/mL,对美罗培南的 MIC 分别为 6 μg/mL、16 μ g/mL 和 32μg/mL,对厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦耐药、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、左氧氟沙星和庆大霉素均高度耐药;菌株Eco3对阿米卡星敏感,菌株Eco1和Eco2对阿米卡星高度耐药.菌株Eco1产CTX-M-79、SHV-11、IMP-4、CMY-6 和 NDM-1,菌株 Eco2 产 CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6 和 NDM-1,菌株Eco3产CTX-M-14、CMY-6和IMP-4.CCCP不能提高Eco1、Eco2和Eco3对亚胺培南的敏感性,SDS-PAGE发现菌株Ompk35和Ompk36未见缺少,3株大肠埃希菌EDTA增强实验阳性.仅菌株Eco1的NDM-1金属β-内酰胺酶通过接合试验传递到大肠埃希菌J53上,其接合子对亚胺培南和美罗培南耐药,EDTA增强实验阳性;菌株Eco2接合子和转化子不含NDM-1金属β-内酰胺酶,其接合子和转化子对亚胺培南和美罗培南敏感;菌株Eco3接合试验和转化试验未成功.结论:同时产CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6、NDM-1、IMP-4或CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6、IMP-4 β-内酰胺酶的大肠埃希菌可引起亚胺培南高度耐药.
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