慢病毒导入的PLC-γ1 siRNA对人大肠癌细胞运动的影响
Effect of lentiviral-delivered PLC-γ1 siRNA on metastasis of human colorectal carcinomas cell lines
摘要目的:通过RNA干扰技术客观地研究PLC-γ1与大肠癌细胞多种生物学行为的关系.制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制PLC-γ1的重组病毒,以建立PLC-γ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用.方法:制备产生PLC-γ1 siRNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞.应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLC-γ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析.黏附能力实验和迁移能力实验分别检测细胞运动状态的影响.结果:成功构建了含PLC-γ1shRNA基因的重组慢病毒,PLC-γ1 siRNA可显著下调LoVo细胞中PLC-γ1的表达.重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,显著降低了细胞的黏附能力和迁移能力.结论:PLC-γ1可能与大肠癌的转移性能密切相关.
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