小鼠肠癌HSP70多肽复合物的纯化及其抗肿瘤免疫效应
Purification and antitumor effect of mouse colon carcinoma heat shock protein 70 polypeptide complex
摘要目的:应用AKTA-purifier100液相层析系统,建立分离和纯化热休克蛋白70(HSP70)多肽复合物的方法,并观察其抗肿瘤免疫保护效应.方法:采用DEAE-Sepharose离子交换层析和ADP-Ag-arose亲和层析,从热处理的BALB/c鼠源性结肠癌细胞(CT26)制备裂解液中分离、纯化HSP70多肽复合物,并通过主动免疫保护实验观察其抗肿瘤免疫效应.结果:纯化蛋白经鉴定为相对分子质量70×103左右的HSP70多肽复合物;平均1 g湿重肿瘤细胞可获得63.63 μgHSP70多肽复合物;HSP70主动免疫的小鼠可抵抗CT26细胞的攻击.结论:用此层析法可分离纯度较高的HSP70,并可诱导明显的抗肿瘤免疫保护效应.
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