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人卵巢癌细胞系A2780肿瘤干细胞分离培养与鉴定

Isolation and identification of tumor stem cells from human ovarian carcinoma cell line A2780

摘要目的:从人卵巢癌细胞系A2780中分离培养卵巢癌干细胞,并对其特性进行鉴定.方法:将A2780细胞消化,离心制成单细胞悬液,悬浮于含有生长因子的无血清培养基(SFM)中获得肿瘤细胞微球体,流式细胞仪检测细胞表面分子标志CD44和CD133的表达;Transwell小室侵袭实验检测肿瘤微球体的体外侵袭能力;CCK-8检测微球体细胞的增殖能力,比较两种细胞的倍增时间;将肿瘤微球体置于含有血清的培养基使其诱导分化,并观察其形态学变化.结果:A2780可在SFM中形成可悬浮生长、稳定传代的肿瘤细胞微球体.与贴壁的肿瘤细胞相比,微球体高表达干细胞标志CD44和CD133(P<0.05),具有更强的体外侵袭力(t=9.354,P<0.05)和增殖能力(t=13.682,P<0.05),及更短的倍增时间(t=3.773,P<0.05),在血清环境下可分化为普通的肿瘤细胞.结论:用含有生长因子的SFM悬浮卵巢癌细胞系A2780可获得卵巢癌肿瘤细胞微球体,此细胞球体中富集有肿瘤干细胞.

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