摘要目的 微小RNA-15a(microRNA-15a,miRNA-15a)在多种癌症中的表达均降低,是一类抑癌基因,可在体内外发挥抗肿瘤作用.然而,目前关于miRNA-15a在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及作用机制研究甚少.因此,本研究探讨miRNA-15a在85例HCC组织中的表达及其对HepG2细胞侵袭和迁移的影响.方法 选择2017-02-05-2018-08-05在广东医科大学附属医院确诊的HCC患者85例、慢性乙肝患者70例、肝硬化患者72例及健康体检人群64名(健康对照组),采用qRT-PCR法检测各组患者血清中miRNA-15a的表达水平.选择HepG2细胞并分为空白对照组、miRNA-15a阴性对照组和miRNA-15a mimic组3组,培养48 h.qRT-PCR法检测转染后各组细胞miRNA-15a的表达水平,Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力,双荧光素酶靶标实验验证miRNA-15a与GABP的靶向关系,蛋白质印迹法和qRT-PCR法检测各组细胞GABP、Notch1、Hes-1蛋白和mRNA表达水平.多组间均值差异比较采用单因素方差分析,方差齐两两多重比较采用LSD-t方法.方差不齐两两多重比较采用Tamhane's T2方法;miRNA-15a表达与临床病理参数间的关联采用χ2检验.结果 临床标本测定结果表明,HCC患者血清miRNA-15a相对表达量(0.65±0.02)低于慢性乙肝患者(1.42±0.16)、肝硬化患者(1.45±0.20)和健康对照组(1.53±0.15),差异有统计学意义,F=638.641,P<0.05;miRNA-15a低表达与患者的年龄、性别无关联,而与肿瘤TNM分期(χ2=11.998,P<0.05)、转移(χ2=5.406,P<0.05)有关联.细胞实验结果显示,与空白对照组(1.00±0.20)和miRNA-15a mimic NC组(1.01±0.17)相比,miRNA-15a mimic组miRNA-15a表达水平(2.80±0.37)升高,F=48.514,P<0.05;miRNA-15a mimic组穿透基质胶的细胞数量及迁移率低于空白对照组和miRNA-15a mimic NC组,P<0.05.双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,GABP是miRNA-15a的靶基因,miRNA-15a mimic组GABP蛋白及mRNA表达水平(0.10±0.06和0.38±0.04)与空白对照组(0.65±0.06和1.00±0.15)和miRNA-15a mimic NC组(0.58±0.06和1.03±0.26)相比降低,F蛋白=73.663,F mRNA=12.970,均P<0.05.miNRA-15a mimic组Notch1、Hes-1蛋白及mRNA表达水平(0.68±0.05和0.63±0.07,0.48±0.11和0.66±0.08)低于正常对照组(0.68±0.05和1.48±0.04,1.00±0.14和1.00±0.11)和miRNA-15a mimic NC组(0.70±0.05和1.50±0.05,1.01±0.12和1.00±0.19),F Notch1蛋白=131.462,F Hes-1蛋白=332.787,F Notch1 mRNA=17.216,F Hes-1 mRNA=6.010;均P<0.05.结论 HCC患者血清中miRNA-15a低表达,miRNA-15a可靶向GABP通过Notch信号通路抑制HepG2细胞的侵袭和迁移能力.