换一批
换一批乙肝病毒核心抗原展示载体的原核表达与电镜检测
Prokaryotic expression and electron microscopic examination of Hepatitis B virus core antigen display vector
摘要目的 将多克隆酶切位点MCS插入乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的loop区,构建乙肝病毒核心抗原展示载体.方法 将多克隆酶切位点MCS插入到HBcAg的c/e1 loop区,取代了HBcAg c/e1 loop区的Pro79与Ala80氨基酸残基,成功构建了pET28a-HBcAg-MCS原核表达载体,将其转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,利用不同IPTG浓度梯度进行原核诱导表达与NI-NTA亲和层析纯化,利用SDS-PAGE电泳和透射电镜检测.结果 成功表达了HBcAg-MCS融合蛋白,且最佳的IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L,利用镍柱纯化得到了较纯的HBcAg-MCS融合蛋白,进一步利用负染法透射电子显微镜检测到HBcAg-MCS融合蛋白呈现病毒样颗粒结构.结论 HBcAg-MCS融合蛋白能够自发形成病毒样颗粒结构,为乙肝核心抗原HBcAg作为展示载体的广泛应用打下基础.
更多相关知识
关键词
乙肝病毒核心抗原病毒样颗粒多克隆酶切位点Hepatitis B virus core antigenVirus-like particlesMultiple cloning site(MCS)
分类号
R373.2+1
栏目名称
实验研究论著
DOI
10.3969/j.issn.1672-3619.2017.10.006
发布时间
2017-12-04
基金项目
国家自然科学基金青年项目
海南省科技项目
- 浏览91
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
