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芪合酶基因的克隆与植物表达载体的构建

Cloning of Stilbene Synthase Gene and Construction of Its Plant Expression Vector

摘要为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因克隆、植物表达载体构建及导入受体细胞的研究.从葡萄2个品种--雷司令和粉红玫瑰的叶片中提取基因组DNA,并以其为模板,经PCR扩增芪合酶基因,各获得一长约1.6 Kb的片段,将这2个片段分别连接到pGEM-Teasy和pUCm-T上进行测序,1个片段长为1 622 bp(命名为S1),另一个片段长为1 617 bp(命名为S2).然后将S1正向插入pEV2的果实特异性启动子TFP2和NOS终止子,构建了植物表达载体pEV2S1;将S2正向插入植物表达载体pEI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建了植物表达载体pBS2.将重组体pEV2S1和pBS2转化大肠杆菌E.coli XL1,并对重组体进行了筛选和鉴定.

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