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橡胶树肌动蛋白解聚因子原核表达及纯化

Prokaryotic Expression and Purification of Actin Depolymerizing Factor in Rubber Tree

摘要本研究根据HbA DF序列设计引物扩增基因的编码区,并将其插入到原核表达载体pET28a上,成功构建重组质粒pET28a-HbADF.将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3)宿主菌,经1 mmol/L IPTG诱导,获得相对分子量为20 ku的融合蛋白.表达蛋白以可溶和包涵体两种形式存在,通过亲和层析方法纯化可溶蛋白并获得HbADF融合蛋白,用抗HIS标签的单抗对纯化蛋白进行了Western blot鉴定.该结果为进一步研究HbADF蛋白特性及功能奠定基础.

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