大熊猫诱导多能干细胞外泌体的分离鉴定及功能研究
Identification and Functional Study of Exosomes Derived from Giant Panda Induced Pluripotent Stem Cells
摘要目前已成功获得了大熊猫诱导多能干细胞(iPSCs),然而关于大熊猫诱导多能干细胞外泌体(GPiPSCs-Exos)的研究尚未见报道.通过超速离心方法从iPSCs培养液上清中分离出GPiPSCs-Exos,其呈杯托样或凹半球样,直径30~150 nm,平均为82.8 nm±18.8 nm.蛋白免疫印迹检测显示,GPiPSCs-Exos表达外泌体分子标记蛋白TSG101和CD9,但不表达内质网特异性标记蛋白CALNEXIN.miRNAs鉴定发现表达量前3的分别为hsa-miR-148a-3p(12.94%)、hsa-miR-3529-3p(7.38%)和hsa-miR-7-5p(7.38%),miRNAs靶基因显著富集在Ras信号通路.此外,3 μg·mL-1 GPiPSCs-Exos能显著提升大熊猫皮肤成纤维细胞的增殖能力.本研究结果为GPiPSCs-Exos的功能研究及其在疾病治疗中的应用奠定了基础.
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