换一批
换一批水稻精细胞基因RSSG58启动子的克隆分析及表达载体构建
Clonine and Analysis of the Promoter of RSSG58 Gene in Rice Sperm Celms and Construxtion of Expression Vector
摘要根据公布的水稻基因组测序的比较和水稻精细胞优势表达的RSSG58基因cDNA序列,以水稻品种"桂朝2号"黄化苗基因组DNA为模板,用PCR方法克隆出RSSG58在起始密码子以前的上游调控序列Pr58.经对Pr58启动子进行的鉴定和分析表明,具备大多数高等植物启动子的保守元件,预计它对RSSG58基因在的特异表达方面具有一定的作用.为了鉴定RSSG58基因的基本启动子元件,将RSSG58基因5′侧翼序列做缺失片段分析,由PCR从Pr58中得到3个不同大小两端带有Hind Ⅲ,BamHⅠ酶切位点的片段Pr58Ⅰ,Pr58II和 Pr58III,定向插入载体pMGFP4(pBI221改建,报告基因为GFP)中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了由驱动报告基因GFP的植物表达载体pRGFPⅠ,pRGFPII和 pRGFPⅢ,用于农杆菌介导法水稻遗传转化.其目的是为进一步在模式植物中研究其表达功能奠定基础.
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