换一批
换一批本生烟NbSABP2和NbSAMT基因的克隆及VIGS表达载体构建
Construction of VIGS expression vector carrying NbSABP2 and NbSAMT genes cloned from Nicotiana benthamiana
摘要采用RT-PCR技术从本生烟中分别克隆获得水杨酸结合蛋白2(salicylic acid-binding protein2,SABP2)和水杨酸羧基转甲基酶(SA methyl transferase,SAMT)基因的全长序列.利用Gateway定向克隆系统,分别将SABP2和SAMT部分序列片段插入到烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体中,构建了重组病毒载体pTRV2-NbSABP2和pTRV2-NbSAMT.将重组载体转化农杆菌GV2260,通过TRV病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)系统,分别抑制本生烟SABP2和SAMT基因的表达.与TRV2空载体相比,pTRV2-NbSABP2载体浸润的植株生长矮小,叶柄基部和叶脉褐化,叶片向下塌陷；pTRV2-NbSAMT载体浸润的植株生长正常,无明显的表型改变.
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