换一批
换一批菠菜43 kD叶绿素a结合蛋白编码基因克隆及原核表达条件优化
Cloning and prokaryotic expression of spinach 4 3 kDa chlorophyll a binding protein gene in Escherichia coli
摘要将菠菜43 kD叶绿素结合蛋白编码基因亚克隆至原核表达载体pET-28a上,构建重组表达质粒pET-28a-psbC转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导实现了外源基因的可溶性表达.探讨了含组氨酸标签融合蛋白的最佳表达条件(包括表达单克隆、时间、温度对表达的影响).利用Ni2+-Sepharose 4 Fast Flow亲合层析纯化出His-apo CP43蛋白.体外重组实验证实 His-apo CP43能特异结合叶绿素a,经过温和电泳分离纯化所得体外重组色素蛋白复合物具有与提取自类囊体膜的天然CP43相似(但不完全相同)的荧光特性.
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关键词
43kD叶绿素a结合蛋白原核表达条件优化色素重组荧光性质His-apo-CP43 fusion proteinprokaryotic expressionpurificationreconstitution experi-mentfluorescence
分类号
Q7
栏目名称
生物学
DOI
10.3969/j.issn.0490-6756.2015.01.035
发布时间
2015-02-12
基金项目
国家973计划项目
国家自然科学基金资助项目
教育部博士点基金
西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助
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