快速高通量测定三角褐指藻油脂含量
Rapid determination of oil content in Phaeodacylum tricornutum by high-throughput method
摘要为了实现三角褐指藻细胞内油脂含量的快速高通量测定,探索了尼罗红荧光染色法检测其油脂含量的检测条件.采用96孔板并配合酶标仪考察三角褐指藻的预处理液的种类及其用量、染色液尼罗红的用量、染色温度、染色时间以及细胞浓度对荧光强度的影响,确立最优染色条件,并研究荧光强度与油脂含量之间的对应关系.结果表明,TritonX-100终浓度为0.05%时,通透效果最佳,每100 μL藻悬液中加3μL尼罗红染液(0.1 mg/mL),温度40℃,时间10 min,细胞浓度低于3×106个/mL时,荧光强度(y)与油脂含量(x)之间呈现良好的线性关系:y=927.37x+15.913,R2 =0.9247.方法优化后,90 min即内可完成对96个样品的处理及分析,极大提高了分析的通量.
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