换一批苦荞黄烷酮3-羟化酶基因FtF3H及其启动子的克隆与功能分析
Cloning and Functional Analysis of Flavanone 3-Hydroxylase Gene FtF3H and Its Promoter in Fagopyrum tataricum
摘要[目的]克隆苦荞FtF3H基因及其启动子序列,探究该基因的生物学效应及启动子对环境因素与激素的响应.[方法]基于苦荞基因组和转录组数据克隆FtF3H基因及其启动子,对二者进行生物信息学分析,采用qRT-PCR技术检测FtF3H对MeJA、ABA和光处理的响应,进一步利用转基因拟南芥技术,分析FtF3H的过表达对黄酮合成的影响.[结果]苦荞FtF3H基因DNA序列长2 034 bp,包括2个内含子和3个外显子;其ORF序列为1 104 bp,推导的FtF3H蛋白含367个氨基酸残基,归类于2-酮戊二酸依赖性双加氧酶超家族且具有典型的植物F3H的分子特征.启动子PFtF3H在核心启动子基序外,还含有数目众多的光应答元件和激素响应元件,qRT-PCR检测结果显示,PFtF3H 可强烈响应ABA、MeJA和光照的诱导.转基因拟南芥中,FtF3H的过表达可引起总黄酮含量显著增加(P<0.05),黄酮合成相关酶基因,AtANS、AtDFR和AtF′3H等的表达量显著上调(P<0.05),而拟南芥内源的AtF3H表达受到抑制(P<0.05).[结论]苦荞FtF3H基因是一个典型的植物黄烷酮3-羟化酶,其表达受到激素和光的调控,在拟南芥中的过表达可促进黄酮的合成和积累.
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关键词
苦荞黄烷酮3-羟化酶基因启动子黄酮功能分析Fagopyrum tataricumflavanone 3-hydroxylase genepromoterflavonoidsfunctional analysis
栏目名称
DOI
10.16036/j.issn.1000-2650.202210202
发布时间
2023-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31871698）
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