换一批条斑紫菜单孢子形成的超微结构及分子生物学证据
Ultrastructural and molecular evidence for monospore formation in the thallus of Porphyra yezoensis
摘要条斑紫菜具有放散单孢子的特性,其在紫菜苗种生产中具有极其重要的意义.为了探索条斑紫菜营养细胞分化发育成单孢子的机理,以条斑紫菜叶状体为研究材料,依据单孢子的形成过程,将其划分为营养细胞、单孢子母细胞(或单孢子囊)及未释放的单孢子等3个区域,同时收集刚刚放散的单孢子,相应地代表了单孢子发生过程中的四个阶段.显微及超微结构观察结果表明,随着营养细胞向单孢子的分化,细胞颜色由深绿色变成金黄色,大小由营养细胞的15～30μm变成单孢子的10～13μm,形状由多角形变成圆球形,细胞内的液泡逐渐变小以至消失,星状叶绿体逐渐浓缩并居细胞中央,红藻淀粉和大小纤维囊泡大量出现,线粒体数目显著增加等等.对上述3个区域的组织进行酶解获得单细胞,然后提取RNA,其产率为每g细胞获得RNA 20～40μg,A260/A280的比值分别为营养细胞2.046、单孢子母细胞2.058及未释放的单孢子2.103,显示这种提取RNA的方法是简便、有效、可行.对mRNA进一步纯化后通过反转录PCR合成cDNA,发现4个阶段的cDNA电泳图谱有些变化,特别是未释放的单孢子明显缺少1 kb条带,说明在单孢子形成过程中遗传信息的表达发生变化.但导致单孢子产生的分子机理仍有待进一步研究.
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