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整合素β1诱导人乳腺癌MCF-7细胞迁移侵袭及三苯氧胺耐药

Integrin β1 Promotes Migration and Invasion of Breast Cancer MCF-7 Cells and Tamoxifen Resistance

摘要目的:研究整合素β1(integrinβ1,ITGB1)在人乳腺癌MCF-7细胞过表达对其迁移侵袭能力及三苯氧胺(tamoxifen,TAM)耐药的影响.方法:构建携带ITGB1的质粒(pBABE-puro-myc-ITGB1),通过包装反转录病毒转染人乳腺癌MCF-7细胞系,构建稳定高表达ITGB1的细胞株MCF-7-ITGB1;实验设置MCF-7组(对照组)、MCF-7-vector组(阴性对照组)和MCF-7-ITGB1(实验组);采用qRT-PCR和Western blot技术分别检测各组ITGB1 mRNA和蛋白表达量;MTT法检测不同TAM浓度下细胞增殖活性;Transwell实验检测不同ITGB1表达情况下细胞迁移及侵袭能力;Western blot检测上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、间质表型标志物波形蛋白(vimentin)、纤维黏连蛋白(fibronectin)等相关蛋白的表达情况.结果:在人乳腺癌细胞MCF-7中,成功构建稳定高表达ITGB1细胞系;MCF-7及MCF-7-ITGB1的TAM半数抑制浓度(half-maxi-mal inhibitory concentrations,IC50)分别为1.24 nmol/L和20.28 nmol/L;MCF-7-ITGB1的耐药指数为16.35.MCF-7-ITGB1较MCF-7及MCF-7-vector细胞迁移及侵袭能力显著增强,差异有统计学意义(P<0.05).MCF-7-ITGB1的EMT标志物E-cadherin显著下调(P<0.05),fibronectin、N-cadherin、vimentin蛋白显著上调(P<0.05).结论:稳定过表达ITGB1促进乳腺癌MCF-7细胞迁移侵袭能力增强及三苯氧胺的耐药,其作用机制可能与ITGB1活化上皮间质转换通路诱导细胞EMT相关.

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作者 杨钱 [1] 陈振海 [1] 胡淞 [1] 付伟杰 [1] 学术成果认领
作者单位 400000 重庆,重庆大学附属中心医院/重庆市急救医疗中心/重庆市第四人民医院 普通外科 [1]
分类号 R73-37R737.9
栏目名称 基础研究
DOI 10.3969/j.issn.1674-0904.2022.06.002
发布时间 2022-08-02
基金项目
重庆市自然科学基金面上项目
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