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耐热β-半乳糖苷酶(Pyrococcus furiosus DSM 3638)活性位点N415 S点突变对其酶活性的影响

The effect of point mutation N415 S in Pyrococcus furiosus DSM 3638 (a thermo-stable β-galactosidase)on its enzymatic activities

摘要β-半乳糖苷酶具有将乳糖分解为半乳糖和葡萄糖的能力,也具有把半乳糖聚合成低聚半乳糖的能力。这两种能力在工业生产中具有不同的意义。通过点突变使β-galactosidase[Pyrococcus furiosus DSM 3638]415位天冬酰胺(Asn or N)突变为丝氨酸(Ser or S),突变体构建于毕赤酵母表达质粒载体,并筛选以毕赤酵母为宿主细胞的工程菌种,以此制备β-半乳糖苷酶的突变体酶蛋白。研究发现,该突变体的β-半乳糖苷酶活性在95℃、pH5.5时达到最高酶活,为耐高温乳糖酶,且该突变体水解牛奶的能力较好,可用于低乳糖牛奶及其相关制品加工中。而突变后β-半乳糖苷酶的另一个活性,即产生低聚半乳糖的能力的活性也有所提高,但不够明显。因此该位点突变可用于乳制品的加工,但不能期盼产生更多的半乳糖寡聚体。

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作者 尹蕾 [1] 王原媛 [2] 辛志豪 [3] 王向东 [4] 学术成果认领
作者单位 山东大学医学院 细胞生物学研究所,山东 济南250012; 潍坊生物园发展有限公司,山东 潍坊261205 [1] 山东东兴汇智有限公司,山东 潍坊,261205 [2] 潍坊睿真生物科技有限公司,山东 潍坊,261205 [3] 山东大学医学院 细胞生物学研究所,山东 济南,250012 [4]
栏目名称
DOI 10.6040/j.issn.1671-9352.0.2016.399
发布时间 2016-12-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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山东大学学报(理学版)

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